Outros Anos

Acções para Pessoal Docente

Ano de 2002

Biotecnologia – fundamentos e aplicações

 

Conteúdos da Acção

Sessões teóricas (5 horas), onde serão apresentados de forma concisa e actualizada alguns fundamentos de Biologia Celular e Molecular,Microbiologia e Biotecnologia, considerados como importantes para a concretização da respectiva acção de formação.

Sessões de prática computacional (2 horas), onde serão apresentados diversos recursos bioinformáticos actualmente disponíveis em diversas páginas da Internet (nacionais e internacionais), dedicados ao ensino da Biologia.

Sessões laboratoriais (8 + 10 horas), onde serão apresentados e postos em prática os seguintes trabalhos laboratoriais:

- Aplicação de técnicas de microscopia óptica à observação de microrganismos ambientais e de interesse biotecnológico:

- bactérias do iogurte (permite também ilustrar técnicas de coloração - por exemplo, coloração de Gram);

- fungos miceliais (por exemplo, do solo; contaminantes de alimentos; de interesse na produção de antibióticos ou na maturação de queijos);

- leveduras (por exemplo, a espécie Saccharomyces cerevisiae , usada no fabrico do pão e cerveja).

- Isolamento e contagem de populações microbianas em diferentes amostras ambientais (água; solo; parte de uma planta) e/ou alimentos. Com o objectivo de ilustrar a diversidade microbiana e estimar o número aproximado de microrganismos em diferentes amostras ambientais ou alimentares, serão aplicadas técnicas microbiológicas apropriadas ao isolamento de colónias de microrganismos (bactérias e fungos) em meios de cultura apropriados, de acordo com a amostra a analisar. No caso concreto da amostra de água, pretende-se aplicar metodologias que permitam isolar e caracterizar bactérias que são indicadores do grau de poluição orgânica e biológica da água (nomeadamente, coliformes).

- Avaliação da concentração celular em populações microbianas. Serão aplicados três métodos simples, directos ou indirectos, na avaliação da concentração de células numa suspensão de uma estirpe industrial da levedura Saccharomyces bayanus usada na produção industrial de champanhe. Nomeadamente: (i) contagem de células totais, ao microscópio, por recurso a uma câmara de contagem; (ii) contagem de células viáveis, por diluições sucessivas, inoculação das suspensões diluídas na superfície de meio de cultura sólido e contagem de colónias isoladas; (iii) avaliação da turbidez da cultura. Este trabalho permite introduzir os conceitos de células viáveis e não-viáveis e comparar metodologias com diferentes limites de detecção e diferentes aplicabilidades no laboratório de Microbiologia. Pretendemos ainda ilustrar a aplicabilidade destas metodologias ao acompanhamento do crescimento em descontínuo ("batch") de um microrganismo.

- Extracção de ADN de uma bactéria de laboratório pertencente à espécie Escherichia coli e separação e visualização das moléculas do ADN após electroforese em gel de agarose. Trata-se de um trabalho experimental simples e de execução rápida, que permite introduzir questões de biologia molecular relacionadas com a organização genética de uma célula procariótica. Além disso, as técnicas a utilizar ilustram alguns dos passos essenciais da tecnologia do ADN recombinado, usada na preparação de Microrganismos Geneticamente Manipulados, ou da identificação de microrganismos em amostras ambientais, alimentares, clínicas, por metodologias moleculares modernas. Nomeadamente: (i) extracção e isolamento do ADN de uma bactéria; (ii) digestão deste com enzimas de restrição; (iii) separação dos fragmentos de restrição por electroforese horizontal em gel de agarose.

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